分子生物学

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（20080528，BY晓）
第二章：
1.蛋白质的一级结构：蛋白质分子中氨基酸的排列顺序称为蛋白质的一级结构。主要化学键是肽腱，二硫键。
蛋白质的二级结构：多肽链中主链的局部构象，不涉及氨基酸侧链在主链上的空间排布。其主要化学键是H键。
二级结构的种类：α螺旋，β折叠，β转角，无规则卷曲。
蛋白质的三级结构：具有二级结构、超二级结构的一条多肽链，由于氨基酸侧链的相互作用，进一步卷曲折叠，形成蛋白质的三级结构。其主要化学键是二硫键、H键、盐键、疏水键、VALDER WAALS力。
蛋白质的四级结构：某些蛋白质由两条或多条肽链组成，每条肽链都具有完整的三级结构，称为该蛋白质的一个亚基。亚基之间通过非共价键结合，形成特定的空间结构，称为该蛋白质的四级结构。其主要化学键是疏水键、H键、离子键。
2.基序与结构域的区别：
基序，又称蛋白质的超二级结构，是多肽链内相互邻近的几个二级结构单元在空间上进一步靠近、相互作用形成的规则的二级结构聚集体。
结构域是指许多蛋白质的三级结构中存在一个或多个近似球形的折叠区，它在空间上是独立的，可以通过对多肽链的适当切割与分子的其他部分分开。
基序是一种结构单元，是结构域的组成部分，而结构域是一种功能单元。
3.蛋白质变性：在受到外界理化因素的影响时，蛋白质分子的结构和性质常有所改变，甚至丧失生物活性，这种丧失生物活性的过程称为蛋白质变性。
蛋白质变构：蛋白质在参与生命活动的过程中，为适应需要而发生某种程度的构象变化，称为蛋白质变构。
4.蛋白质的结构和功能的关系：
A蛋白质的一级结构和功能的关系：
蛋白质的一级结构决定其构象，
同源蛋白质存在序列同源现象
构成蛋白质的一级结构可以直接影响其功能
如正常红细胞－镰状细胞－（因血红蛋白中的6号谷氨酸转变为缬氨酸，）－使血红蛋白运输氧气能力下降。
B.蛋白质的构象和功能的关系：
蛋白质的构象直接决定蛋白质的功能，决定功能蛋白的生物活性。
在不改变一级结构的前提下，通过改变构象而改变活性。
5.蛋白质组学：从蛋白质组为研究对象，在整体水平上研究细胞内全部蛋白质的组成、结构及其代谢规律。
第三章：
1.DNA的一级结构：
定义：脱氧核苷酸通过3'，5'－磷酸二酯键连接，构成DNA单链。
方向：头端：5'－磷酸基
尾：3'－羟基
2.DNA的二级结构（多样性）：
β－DNA结构，即右手双螺旋结构
Z-DNA结构，即左手双螺旋结构
A-DNA结构，
十字结构
三股螺旋结构等
3.右手双螺旋结构：
外观：两股反向平行的DNA链绕成同轴右手双螺旋，双螺旋表面有大沟和小沟。
分布：脱氧核糖和磷酸通过3'，5'－磷酸二酯键连接，构成DNA主链，位于双螺旋的外表面，糖基平面与螺旋轴平行；碱基则位于双螺旋的内部，碱基平面与螺旋轴垂直。
两条链连接：两股DNA链通过Watson－Crick碱基对结合，即A与T通过两个氢键结合，G与C通过三个氢键结合，称为碱基互补原则。
相关数据：双螺旋直径为2nm，相邻碱基的堆砌距离为0.34nm，旋转夹角为36°，每一螺旋含10bp（碱基对），螺距为3.4nm；在溶液状态下，每一螺旋含10.5bp，螺距为3.6nm。
4.染色体的主要发现成分：DNA，RNA，非组蛋白，组蛋白（H1，H2A，H2B，H3，H4）
5.mRNA：是携带来自DNA的遗传信息并指导蛋白质合成的RNA。
特点：1.种类多，不同基因表达不同的mRNA，2.寿命短，3.含量少，4.分子大小不均一，差异极大。
6.tRNA：是在蛋白质合成过程中负责转运氨基酸的RNA。
特点：tRNA是单链小分子。
tRNA含7～15个修饰碱基，多为常规碱基甲基化产物。
tRNA的5’端核苷酸往往是pG。
tRNA的3’端是CCA-OH序列。
所有tRNA的二级结构都呈三叶草形，该结构含三环（D环，反密码子环，TΨC环）四茎（D茎，反密码子茎，TΨC茎，受茎），反密码子含由三个碱基组成的反密码子。
tRNA都具有相同的倒L形三级结构。
7.rRNA：rRNA是细胞内含量最多的RNA。rRNA与核糖体蛋白构成核糖体，由两个亚基构成。原核是30S小亚基和50S大亚基。真核是40S小亚基和60S大亚基。
8. 基因：细胞内遗传物质的功能单位，主要存在于染色体上，并通过生殖细胞世代相传。基因本质是DNA序列。
基因组：一个染色组所含的全部DNA称为一个基因组。
编码序列：通常指基因中直接编码成熟RNA（不包括mRNA）碱基序列或蛋白质多肽链氨基酸序列的DNA碱基序列。
非编码序列：是指基因中除编码序列以外的所有序列。
外显子：是真核生物基因经过转录加工后保留于mRNA中的序列和相应的DNA序列。
内含子：是真核生物基因在转录加工时被切除的RNA序列和相应的DNA序列。
启动子：是在DNA指导合成RNA时，RNA聚合酶首先结合并启动转录的位点，多数位于基因转录区的上游，属于调控序列。
转录起始位点：是在指导合成RNA时，DNA被转录的第一个碱基。
终止子：是转录的终止信号，位于基因转录区的下游。
8.原核生物基因组的结构特征：
基因组通常由单一闭环双链DNA分子组成，
基因组DNA只有一个复制起点。
基因组所含基因数量较多，而且形成操纵子结构。
基因组编码序列一般不重叠，
基因是连续的，无内含子。
编码序列约占基因组的50％，比例高于真核生物基因组。
非编码序列主要是一些调控序列。
9.真核生物基因组的结构特征：
真核生物基因组DNA是线性分子，其末端序列特殊，由寡核核苷酸短串联重复序列构成，称为端粒。
真核生物基因组DNA有多个复制起点。
真核生物有完整的细胞核，核DNA与组蛋白、非组蛋白及RNA形成染色体结构。
每一种真核生物的染色体数目是一定的
真核生物基因组序列的90％以上是非编码序列。
真核生物基因组含大量重复序列。
真核生物基因是不连续的
真核生物基因的转录产物是单顺反子mRNA。
真核生物基因组存在各种的基因家族。
10.基因家族是指碱基序列或编码产物的结构具有一定程度同源性的一组基因。
多基因家族是指由同一祖先经过重组和变异所产生的一组基因，可以丛集鱼同一条染色体上，也可以散布于不同的染色体上，其编码产物多具有相似的功能。
基因超家族是指一组由多基因家族和单基因组成的更大的基因家族。
11.人类基因组的四张图谱：遗传图谱，物理图谱，转录图谱，序列图谱。
12.病毒基因组的结构特征:
所含核酸的种类和结构不同。
所含核酸的分子数不同，
基因组的大小差异较大，
基因组为单倍体且含单拷贝基因，
基因组序列基本上是编码序列，
基因的连续性不同，
相关基因丛集成一个功能单位或转录单位，
有些病毒基因组存在基因重叠现象，
有些基因组含有不规则结构基因。
第四章
1.DNA复制过程所需的物质：DNA模板，dNTP底物，DNA聚合酶，引物，Mg2+；
DNA复制的定义：以亲代DNA为模板，合成碱基序列与其完全相同的子代DNA分子，从而将遗传信息准确地传递给子代DNA分子的过程。
2.DNA复制的基本特征：①半保留复制，②从复制起点双向复制，③半不连续复制。
A半保留复制：当DNA进行复制时，亲代DNA分子的两股链必须分开，分别作为模板，按照碱基互补原则指导合成一股新的互补链，结果产生两个子代DNA分子，每个DNA分子都含一股亲代DNA链和一股新生DNA链。
B复制叉：复制时DNA在解链点形成分叉结构，这种结构称为复制叉。
C半不保留复制：DNA新生链的合成方向是5'→3'，而DNA的两股链是反向平行的。其中前导链的合成方向与其模板的解链方向一致，所以解链与合成可以同时进行，合成是连续的。而后随链的合成方向与其模板的解链方向相反，只能先解开一段模板，再合成新生链，合成是不连续的。
D闭环双链DNA复制方式有θ复制，滚环复制，D方案复制。
3.原核生物DNA的复制：
A：参与DNA复制的酶和蛋白质
①DNA聚合酶：
5'→3'聚合酶活性与延伸能力。
3'→5'外切酶活性与校对功能，
5'→3'外切酶活性与切口平移。
②解旋酶的作用：解开DNA双链，打开H键，形成两条单链。
拓扑异构酶：有两类：其中Ⅰ型拓扑异构酶，能催化DNA的一股链发生断裂和再连接，消除负超螺旋（连环数增加）。Ⅱ型拓扑异构酶，催化DNA的两股链同时发生断裂和再连接，既可以消除负超螺旋（连环数增加），也引入负超螺旋（连环数减少），同时也参与DNA的复制合成。
③单链DNA结合蛋白：稳定解开的单链的DNA，阻抑其重新形成双链，抗核酸酶降解。
④引物酶：DNA复制需要RNA引物，RNA引物由引物酶催化合成。
⑤连接酶：能催化环状DNA或冈崎片段合成之后留下的切口处的5’－磷酸基与3’－羟基连接形成磷酸二酯键的酶。
B复制过程：
复制起始：在DNA复制的起始阶段，亲代DNA解链、解旋。
复制延长：前导链的合成，后随链的合成，前导链和后随链的协同合成，DNA复制过程中的双重校对。
复制终止：
4.真核生物DNA的复制：
合成过程的区别：在终止阶段有端粒的合成。
5.DNA损伤的类型：错配，插入和缺失，重排，共价连接。
6.引起DNA损伤的因素：
1.复制错误.
2.自发性损伤，
3.物理因素，如紫外线和各种辐射，
4.化学因素。
5.生物因素。
7.DNA修复包括错配修复，直接修复，切除修复，重组修复，SOS应答和易错修复。
8.错配修复就是在DNA复制完成以后，依赖模板提供的信息，对新生链上的错配碱基进行修复。
9.SOS应答产生两类效应：一类是增加与修复系统有关基因的表达，从而提高修复能力；另一类是启动易错修复。
第五章：
1.转录是指以DNA为模板按照碱基互补原则指导合成RNA的过程。
RNA的转录过程需要DNA模板，NTP底物，RNA聚合酶，Mg2+或Mn2+.
RNA转录的基本特征：选择性转录，不对称转录，转录后加工。
2.RNA聚合酶的特点：
①不需要引物，直接合成RNA，
②只转录模板链
③按照碱基互补原则，
④按5'～3'方向催化合成RNA，
⑤催化合成RNA过程是连续进行的
⑥没有水解酶活性，没有校对功能。
⑦可以与基因表达调控蛋白相互作用，调控基因表达。
3.大肠杆菌RNA聚合酶亚基的功能：
α：识别并结合上游启动子元件，
β：含活性中心，催化形成磷酸二酯键，
β'：结合DNA模板，
σ：协助核心酶识别并结合启动子元件，
ω：未知。
4. 真核生物RNA聚合酶：
RNA Pol
位置
产物
对α-鹅膏蕈的敏感性
Pol Ⅰ
核仁
28s,18s,5.8s rRNAs
不敏感
Pol Ⅱ
核质
hnRNA,mRNA,某些SnRNAs
高度敏感
Pol Ⅲ
核质
tRNA,5SrRNA,某些SnRNAs
片段特异，中等敏感
5.与转录有关的调控序列：
A原核生物的启动子：是RNA聚合酶识别、结合和启动转录的一段DNA序列，位于转录区的上游。启动子有两段序列具有高度的保守性和一致性，即：
Sextama框：位于上游第35个核苷酸附近，称为-35区。含一个6nt的共有序列，即TTGACA，是RNA聚合酶识别位点。
Pribnow框：位于上游第10个核苷酸附近，称为-10区。含一个6nt的共有序列，即TATAAT，是RNA聚合酶结合位点。
B原核生物的终止子：是位于转录区下游的一段DNA序列，最后才被转录，编码RNA的3’端。
不依赖ρ因子的终止子：特征有二——一是存在G-C回文序列，可以形成茎环结构，二是之后有一串U
依赖ρ因子的终止子：需要ρ因子，与RNA结合，具有ATPase和ATP依赖性解旋酶活性。
C真核生物的启动子：
Ⅰ类启动子：存在于rRNA基因中，是rRNA基因的启动子。
人类rRNA基因的启动子包含两个共有序列：
核心元件：决定转录起始的精确位置，
上游元件：增强转录活性。
Ⅱ类启动子：存在于mRNA基因中，是mRNA基因的启动子。（重中之重）包含以下两类元件：
①核心元件：
起始子：含共有序列为YYANT/AYY，（Y为嘧啶核苷酸，A为转录起始位点
TATA框：又称Hogness框，共有序列为TATAAAA，，容易解链，有利于RNA聚合酶结合并启动转录。
下游元件：共有序列是A/GGA/TCGTG。
②上游元件：
GC框：含两个共有序列，即GGGCGG和CCGCCC。
CCAAT框：共有序列为CCAAT。
Ⅲ类启动子：是tRNA、5S rRNA和部分snRNA基因的启动子。
D真核生物的终止子：
mRNA基因：下游有一个共有序列AATAAA及其下游的GT序列，二者统称加尾信号。
rRNA基因：下游有一个18bp的终止序列。
tRNA和5S rRNA：下游存在茎环，富含GC序列和至少4个连续的T.
6.原核生物的转录后加工：
mRNA前体
rRNA前体
tRNA前体：剪切，添加3’端CCA-OH，修饰碱基。
7.真核生物的转录后加工：
①mRNA前体：
加帽：m7GpppNp帽子，
加尾：poly(A)尾，
剪接，
修饰，
编辑。
②rRNA前体：
甲基化，
剪切。
5S rRNA由单独基因编码，由RNA聚合酶Ⅲ催化转录。
成熟rRNA与核糖体蛋白在核仁组装成核糖体的60S大亚基和40S小亚基，转运到细胞质基质内，参与蛋白质合成。
③tRNA前体：加工时添加3’端CCA-OH，修饰碱基。
第六章：
1.密码子：指从mRNA编码序列5’端向3’端按每三个相邻碱基一组连续分组，每组碱基构成一个遗传密码，称为三联体密码或密码子。
密码子有64个，其中61个编码氨基酸，另外3个UAA,UAG,UGA为终止密码子。
特性：连续性，简并性，通用性，摆动性。
2.阅读框：mRNA分子上从一个起始密码子到其下游一个终止密码子所界定的一段编码序列。
3.一种氨基酸可能有多种tRNA——同工tRNA，，一种tRNA可能识别几个密码子－——同义密码子。
4.多核糖体循环：
在合成蛋白质时，许多核糖体会同时结合在一个mRNA分子上，形成多核糖体结构，进行翻译。
核糖体在一轮翻译完成后可以回到mRNA的5’端，重新组装，开始新一轮翻译合成，形成循环。
5.蛋白质合成所需物质，过程：
A．定义：核糖体协助tRNA从mRNA读取遗传信息、用氨基酸合成蛋白质的过程，是mRNA碱基序列鉴定蛋白质氨基酸序列的过程，又称翻译。
B.合成过程：tRNA负载，翻译起始，翻译延长，翻译终止，翻译后加工。
C.主要物质：mRNA从DNA传递遗传信息，tRNA既是氨基酸转运工具又是读码器，核糖体是蛋白质合成机器。
6.真核生物蛋白质的翻译后加工：
糖基化
形成二硫键
折叠和组装
部分切除
氨基酸修饰
7.伴侣蛋白：直接促进蛋白质折叠的一类蛋白质。
第七章：
1. 操纵子：是原核生物绝大多数基因的表达单位。由操纵基因和受操纵基因调控的一组结构基因组成。
2. 转录水平的调控：
乳糖操纵子：
A． 结构：乳糖操纵子是大肠杆菌的一个操纵子，包含3个结构基因lacZ，lacY, lacA，编码催化乳糖代谢的酶。
结构基因lacZ上游存在操纵基因lacO、启动子lacP和CAP位点。
B． 乳糖操纵子的调控：（正调与负调在转录起始环节是如何进行）
乳糖操纵子是在转录起始环节进行调控，有正调和负调。
具体：在没有乳糖，只有葡萄糖存在时，阻抑蛋白与操纵基因结合，阻挡RNA聚合酶沿DNA移动，阻抑转录，即负调。
当有乳糖存在时，乳糖的异构体别乳糖与阻抑蛋白结合，使阻抑蛋白的构象发生改变，不能与操纵基因结合，失去阻抑作用，RNA聚合酶可以转录结构基因。
C． 大肠杆菌内cAMP的浓度与葡萄糖的浓度成负相关。
色氨酸操纵子：
A． 结构：包含5个结构基因，分别为trpE、trpD、trpC、trpB、trpA。色氨酸操纵子还包括操纵基因trpO、启动子trpP和前导序列trpL。色氨酸操纵子上游存在调节基因trpR，编码阻抑蛋白trpR。
B． 色氨酸操纵子的阻抑调控：
具体：当培养基中有大量色氨酸时，阻抑蛋白与色氨酸结合而改变构象，形成活性阻抑物，与操纵基因结合，阻抑结构基因转录，最终降低色氨酸的合成速度。
当培养基中没有色氨酸时，游离的阻抑蛋白不与操纵基因结合，结构基因表达催化合成色氨酸的酶，最终提高色氨酸的合成速度。
C． 色氨酸操纵子的衰减调控：
具体：当色氨酸缺乏时，色氨酰tRNA供给不足，翻译前导肽的核糖体停滞于序列1的色氨酸密码子位点，序列2与序列3形成茎环结构，使序列3不能与序列4形成衰减子结构，后面的结构基因可以完全转录
当色氨酸充足时，色氨酰tRNA供给充足，核糖体快速翻译序列1合成前导肽，并对序列2形成约束，使序列3不能与序列2形成茎环结构，转而与序列4形成转录终止子结构——衰减子，使RNA聚合酶停滞与序列4之后，不能转录下游的结构基因。
3. 衰减子的定义：色氨酸操纵子的前导序列3和序列4存在互补序列，可以形成茎环结构，该茎环结构之后有一段连续的U序列，所以是一个典型的不依赖ρ因子的终止子结构。
真核生物的基因表达调控：
4. DNA水平的调控：
染色质结构改变
DNA甲基化
基因重排
基因扩增
染色质丢失
5. 顺式作用元件：又称真核生物的调控序列，是指与结构基因串联、对基因的转录启动和转录效率起重要作用的DNA序列，包括启动子、增强子和沉默子。（影响自身基因表达活性的DNA序列）。
6. 反式作用元件：又称调控蛋白，是基因编码产物，其调控作用属于一个基因的表达产物调控另一个基因的表达，（为DNA结合蛋白，核内蛋白，可使邻近基因开放正调控，或关闭负调控）。
7. 调控蛋白的结构：
A.DNA结合域：螺旋－转角－螺旋，锌指，发育同源域。
B.转录活化激活域：酸性激活域，富含谷氨酰胺域，富含脯氨酸域
C.二聚化域：亮氨酸拉链，螺旋－环－螺旋。
第八章：
1.细胞通信：指细胞间识别、联络和相互作用的过程。
2.信号转导：针对外源信息所发生的细胞应答反应全过程。
3.第二信使：许多化学信号（第一信使）与细胞膜受体结合，触发细胞内产生小分子物质，包括cAMP、cGMP、DAG、IP3和Ca2+等，这些物质称为第二信使。
4.受体：指化学信号作用于信号转导分子而触发信号转导，与其直接结合的信号转导分子称为受体。
5.G蛋白偶联受体介导的信号转导途径：
A. cAMP与蛋白激酶介导A（PKA）介导的信号转导（重点）：
主要特征：该途径以cAMP浓度升高而激活PKA。
基本过程：化学信号→GPCR→Gs→AC→cAMP→PKA→关键酶/功能蛋白→细胞效应
调控激素：促肾上腺皮质激素释放激素、肾上腺素、促肾上腺皮质激素、卵泡刺激素、胰高血糖素、促黑激素、5－羟色胺、促甲状腺激素、多巴胺、组胺、着嗅剂，促味剂。
B. Ca2+与蛋白激酶C（PKC）、钙调蛋白依赖性蛋白激酶的信号转导：
DAG（甘油二酯）和Ca2+等第二信使的一个重要靶分子是PKC，PKC是最重要的信号转导蛋白。
基本过程：化学信号→Gq→磷脂酶C→IP3→Ca2+通道→Ca2+→Ca2+－PKC→Ca2+－DAG-PKC→关键酶/功能蛋白→细胞效应
调控激素：促性腺激素释放激素、促甲状腺激素释放激素、催产素、抗利尿激素、血管生成素、血管紧张素Ⅱ，胃泌素释放肽、血小板衍生生长因子、谷氨酸等。
第九章以后
1. 核酸纯度鉴定：
A．核酸因其碱基含有共轭双键而对260nm紫外线具有强吸收。
蛋白质对280nm紫外线具有强吸收。
盐和小分子物质对230nm紫外线具有强吸收。
B.测定核酸样品的纯度，可以通过测定其对这几种波长的紫外线的吸收值可得：
a.纯度较高的DNA样品，OD260/ OD280＝1.8
若OD260/ OD280＞1.8，说明样品含有RNA。
若OD260/ OD280＜1.8，说明样品含有苯酚或蛋白质。
b.纯度较高的RNA样品，OD260/ OD280≈1.8～2.0
若OD260/ OD280＜1.8，说明样品含有蛋白质。
c．理想的核酸样品，OD260/ OD280＞2.0
若辞职太小，说明样品含苯酚或异硫氰酸盐等。
C.核酸定量，若OD260＝1.0
相当于50μg/ml双链DNA，或40μg/ml单链DNA（RNA），或20μg/ml寡核苷酸。
2. 核酸凝胶电泳：
琼脂糖凝胶电泳：用于粗略鉴定较大的核酸片段，特别是分子量测定。
聚丙烯酰胺凝胶电泳：用于精确的分离和鉴别核酸片段，适应于测序。
3. DNA测序：
Sanger双脱氧链终止法：是建立四个反应体系合成DNA，四个体系都以待测序DNA为模板，寡核苷酸为引物，四种dNTP为底物，由DNA聚合酶催化合成待测序DNA的互补链。
Maxam-Gilbert化学降解法。
4. 四种印迹杂交技术：
Southern blotting——分析DNA
Northern blotting——分析RNA
Western blotting——分析蛋白质
Eastern blotting——分析蛋白质
5. 核酸的体外扩增：
A. 核酸体外扩增的主要方法是聚合酶链反应（PCR）
B. PCR的基本原理：PCR是一种选择性扩增DNA的方法，PCR的选择性依赖于预先设计的与目的DNA两端序列互补的寡核苷酸引物。
C. PCR的基本化学基础：一是DNA的变形和复性，二是DNA的半保留复制。
D. PCR的基本过程：变性，退火，延伸。
E. PCR的特点：
特异性强
灵敏度高
简便快捷
对样品要求低。
F. PCR的体系组成：
寡核苷酸引物（决定PCR特异性的关键）
耐热DNA聚合酶
dNTP
目的DNA模板
缓冲液
MgCl2或Mg2＋
6. 重组DNA技术：是制备DNA克隆所采用的技术和相关工作的统称。又称基因工程。
7. DNA克隆通常包括五步：
获取目的DNA
选择载体
构建重组DNA
将重组DNA导入合适的细胞
筛选和鉴定重组DNA的宿主细胞。
8. 限制酶位点的特殊性：通常含4～8个bp：具有回文结构。
9. 限制性片段有两种末端：黏端和平端。
10. 载体的选择：
一个理想载体应具备的条件：复制起点，多克隆位点，选择标记，容量大，容易导入宿主细胞，拷贝数高，容易提取和抗剪切力强。
常见的载体有以原核细胞为宿主的质粒载体和噬菌体载体，如pBR322，pUC系列。λ噬菌体载体，M13噬菌体载体。
以真核细胞为宿主的病毒载体。
11. 常用目的DNA的制备方法：
分离纯化，逆转录合成，PCR扩增，化学合成。
12. 目的DNA与载体的体外重组：平端连接，互补黏端连接，加同聚物尾连接，加人工接头连接。
13. 重组DNA技术的应用：
基因文库包括基因组文库和cDNA文库。
基因组文库：是应用重组DNA技术构建的一个克隆群，它包含了一种生物基因组的全部DNA序列。
cDNA文库：是一个包含了一种生物的特定细胞在特定状态下表达的全部基因的cDNA序列的克隆群，常制备用于表达的基因片段。